Tinción de Cápsulas - Rojo Congo - Procedimiento y Resultados

La técnica de tinción se utiliza resaltar las cápsulas, es una técnica de tinción especial que utiliza el colorante Rojo congo para la observación de cápsulas

La cápsula está formada por polisacáridos, levanos, dextranos y celulosas; raramente tiene una conformación proteina. Este material puede ser delgado o grueso, flexible o rígido, las capas rígidas son impermeables a los colorantes, mientras que el glicocáliz es flexible, recibe el nombre de capa mucosa.

La cápsula es una capa exterior gelatinosa que es secretada por la célula y que rodea y se adhiere a la pared celular.  Las células que tienen una cápsula pesada son generalmente virulentas y capaces de producir enfermedades, ya que la estructura protege a las bacterias contra las actividades fagocíticas normales de las células huésped. 

La tinción de la cápsula es más difícil que otros tipos de procedimientos de tinción diferencial porque los materiales capsulares son solubles en agua y pueden desprenderse y eliminarse con un lavado vigoroso. Los frotis no deben calentarse porque la contracción celular resultante puede crear una zona clara alrededor del organismo que es un artefacto que puede confundirse con la cápsula.

Reactivos utilizados en la tinción Rojo Congo

1. Rojo Congo
2. Mordente para cápsula 

Procedimiento para la tinción

1. Preparar un frotis con una gota del colorante rojo congo y dejarlo secar al aire
2. No fijar la preparación al calor y cubrirlo con unas gotas de mordenta para apsula y déjelo actuar 1 minuto
3. Lave la preparación con agua destilada y déjelo secar al aire.
4. Examine sus preparaciones en objetivo 100X

Resultados e Interpretación

• Los microorganismos productores de capsula presentaran un halo por la ausencia del colorante en la capsula.
• Los microorganismos no poseedores de capsula carecen del halo de la cápsula.

Debido a que la cápsula es no iónica, a diferencia de la célula bacteriana, la tinción primaria se adhiere a la cápsula pero no se une a ella. 

Aplicación de la Tinción

1. Se usa para la detección de microorganismos patógenos productores de cápsula.
2. Empleada frecuentemente para uso de docencia y exhibición de cápsula en microorganismos como bacterias y levaduras.

Microorganismos

Encapsulado: Bacillus spp, Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis Clostridium spp.

Sin cápsula: Neisseria gonorrhoreae.